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PCR基因擴(kuò)增儀的優(yōu)勢(shì)眾多,你不可錯(cuò)過!

更新時(shí)間:2023-05-18 瀏覽次數(shù):1430次
  PCR基因擴(kuò)增儀是現(xiàn)代分子生物學(xué)中非常重要的技術(shù)工具和設(shè)備,具有廣泛的應(yīng)用和市場(chǎng)前景。同時(shí),對(duì)于研究者和工作者來說,需要深入掌握PCR基因擴(kuò)增儀的原理、參數(shù)設(shè)置、操作技巧和質(zhì)量控制等方面,才能更好地應(yīng)用和利用這一技術(shù)儀器,推動(dòng)科學(xué)的發(fā)展和人類的進(jìn)步。原理是:將DNA模板、引物和聚合酶等反應(yīng)物混合,通過一系列的反應(yīng)循環(huán),在保證反應(yīng)物不受污染的情況下,加熱使雙鏈DNA分離為兩個(gè)單鏈,降溫使引物在目的基因的兩條單鏈上特異性結(jié)合并延伸合成新鏈,反復(fù)循環(huán)反應(yīng),使得DNA數(shù)量呈指數(shù)狀增長(zhǎng),從而達(dá)到擴(kuò)增的目的。
 
  PCR基因擴(kuò)增儀的技術(shù)特點(diǎn):
 
  1.控溫系統(tǒng):控制系統(tǒng)可以準(zhǔn)確地控制溫度,使反應(yīng)在一定范圍內(nèi)穩(wěn)定進(jìn)行,保證反應(yīng)條件準(zhǔn)確正確。
 
  2.熱蓋:通過控制熱蓋的溫度和加熱時(shí)間,相當(dāng)于是對(duì)反應(yīng)體系進(jìn)行“局部消毒”或者“熱保護(hù)”,避免反應(yīng)體系中產(chǎn)生的雜質(zhì)影響反應(yīng)結(jié)果。
 
  3.冷卻系統(tǒng):PCR反應(yīng)溫度通常在95℃~60℃間波動(dòng),慣性能量會(huì)不斷向周圍環(huán)境釋放,導(dǎo)致溫度的波動(dòng),反應(yīng)漂移,冷卻系統(tǒng)的作用就是保證反應(yīng)體系的穩(wěn)定性。
 
  4.連接器:還有一種叫做“連接器”的裝置,用于連接熱蓋和反應(yīng)管蓋,保證熱蓋與反應(yīng)管之間的緊密貼合,從而妥善地處理反應(yīng)盤中反應(yīng)液的半蒸發(fā)、干燥等問題。
 
  PCR基因擴(kuò)增儀的使用方法:
 
  1.準(zhǔn)備反應(yīng)液:根據(jù)反應(yīng)需要,配置適當(dāng)?shù)姆磻?yīng)體系,具體包括DNA模板、引物、聚合酶、緩沖液等,反應(yīng)物應(yīng)在零級(jí)環(huán)境下秤量。保證各反應(yīng)物質(zhì)量的潔凈和有效性。
 
  2.加熱反應(yīng)體系:將反應(yīng)體系加熱到95℃,使模板DNA分離成單鏈。
 
  3.降溫、延伸:將反應(yīng)體系迅速降溫至引物的退火溫度,使引物結(jié)合到DNA模板上,聚合酶沿著模板鏈向前合成延伸反應(yīng)產(chǎn)物。
 
  4.可選性擴(kuò)展階段:根據(jù)反應(yīng)需要,進(jìn)行擴(kuò)展階段,通常在72℃下進(jìn)行,目的是為了合成整個(gè)產(chǎn)物。
 
  5.結(jié)束反應(yīng):反應(yīng)結(jié)束后,將反應(yīng)管從PCR擴(kuò)增儀中取出,可通過凝膠電泳和其他實(shí)驗(yàn)方法進(jìn)行檢測(cè)和分析。
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